液固吸附色譜
1.1分離原理 液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的,其固定相是固體吸附劑。
1.2固定相 ;吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
1.3流動相 ;流動相要求:
1.3.1選用的溶劑應(yīng)當與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性
1.3.2選用的溶劑應(yīng)有高純度,以防所含微量雜質(zhì)在柱中積累,引起柱性能的改變。
1.3.3選用的溶劑性能應(yīng)與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用示差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
1.3.4選用的溶劑應(yīng)對樣品有足夠的溶解能力,以提高測定的靈敏度。
1.3.5選用的溶劑應(yīng)具有低的黏度和適當?shù)偷姆悬c。
1.3.6應(yīng)盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,以保證工作人員的安全
1.4應(yīng)用 液固色譜是以表面吸附性能力為依據(jù)的,所以它常用于分離極性不同低的化合物,也能分離那些具有相同極性基團,但數(shù)量不同的樣品。
液液分配色譜
1.1分離原理 ;分配色譜法的原理與液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相 ;分配色譜固定相由兩部分組成,一部分是惰性載體,另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
1.3流動相 ;分內(nèi)色譜中,要求流動相盡可能不與固定液互溶
1.4應(yīng)用 ;既能分離極性化合物,又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現(xiàn),分離的選擇性可得到很好的控制。
鍵合相色譜
1.1分離原理 1.1.1正鍵合相色譜分離遠離:使用的是極性鍵和固定性,溶質(zhì)在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜。
1.1.2反鍵合相色譜分離原理:使用的是極性較小的鍵合固定相,其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。
1.2固定相 ;按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學鍵合固定相三種。
1.3流動相 1.3.1正鍵合相色譜中,采用和反相液液分配色譜相似的流動相,流動相的主體成分為己烷或庚烷。
1.3.2反相鍵合相色譜中,流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相,主題為水。
1.4應(yīng)用 1.4.1正鍵合相色譜法的應(yīng)用:多用于分離各類極性化合物如染料、炸藥、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反鍵合相色譜法的應(yīng)用:由于操作簡單,穩(wěn)定性和重復(fù)性好,該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學、醫(yī)藥研究、食品分析和環(huán)境污染分析等多個領(lǐng)域有了很大的應(yīng)用和發(fā)展。
凝膠色譜
凝膠色譜又稱分子排阻色譜,它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。凝膠色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩(wěn)定性。根據(jù)所用流動相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法(GFC)與用有機溶劑如四氫呋喃做流動相的凝膠滲透色譜法(GPC)。